HEPES缓冲液CAS 7365-45-9

直接利用1,2-二氯乙烷作为溶剂，包括羟基乙基哌嗪（5.00 g，0.02 mol），碳酸钾K2CO3（6.00 g，0.04 mol），配备有机械混合和恒温器的100mL腹板中的100ml灌木丛中2-二氯乙烷在90°C的油浴中加热（1,2-二氯乙烷的沸点为85°C），也混合了20h。戒烟，过滤反应，并用200 mL乙酸乙酯（EA）清洁过滤的系统盐。将滤液旋转干燥以获得2.6 g的HEPES缓冲液。

加入11.0 g（84.5 mmol）无水盐亚硫酸盐，27.0毫升（343.6 mmol）二氯乙烷，120毫升水，110ml水，110ml乙醇，50mg铜粉，转到带有磁性搅拌器的三领瓶，还搅拌均匀的搅拌器，还油搅拌均匀的搅拌器被加热到回流。回流22小时后，在减轻应力下蒸发响应溶液以消除水，直到沉淀出所有白色固体。该固体主要由产品组成，未反应的起始材料以及产生的盐。将获得的强和500毫升乙醇加入1 L烧瓶中，并加热至回流40分钟。在热时吸入过滤，以及滤液冷却并放置在0°C过夜。吸入纯化以及真空干燥以获得片状晶体，产量为11.40 g，产量为81.0％。

加入盐氯乙酯（15.10 g，0.08 mol），羟基乙基哌嗪（9.88 g，0.075 mol），60毫升水，油浴到装有磁性搅拌器，倒流冷凝器和热压液的四领瓶中。在105°C下混合反应，随着反应的进行，响应溶液的pH值将下降。包括5mol/l NaOH液体疗法液滴液液以调节pH值约为9。总量添加了15毫升，并且反应持续5H。

反应完成后，将反应服务用水稀释至500 mL，以及与离子交换树脂柱（有关500 g）的相关，用于脱盐过滤。将反应选项全部放在色谱柱上后，用纯水洗涤，直到流出物的pH值为6，然后用1 mol/L氨水冲洗。由TLC。它通过旋转耗散浓缩至150毫升，通过包括活化的碳，加热并在110°C的油浴室中混合0.5 h，过滤，过滤系统，并在滤液中旋转，并在油浴室中混合，并将滤液旋转为50ml，并加热至50ml，并加热至回流0.5 h，并进行温暖的过滤系统。干燥后，白色固体为8.63 g。将冰醋酸滴入滤液中，将pH液滴入5，在0℃下冷却过夜，过滤过滤，并且在干燥后获得的强度为2.80 g。上述HEPES强度为11.43 g，回报率为64.5％。

10mmol/L HEPES屏障的制备方法与：适当重2.383 g的HEPES一样，包括新鲜的三滴水，还稀释至1L。过滤消毒并在等分后保存在4°C下。如果使用它作为缓冲区添加到Cell Society工具中，则建议将介质存储在黑暗中。